【纳昂达】NadPrep®️ 血浆游离 DNA 双端分子标签文库构建试剂盒(for MGI)
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产品特色
- 适用于血浆游离 DNA
- 样本起始量低,文库转化率高
- 双端分子标签接头助力低频突变分析
- 包含 DNA 纯化磁珠,并适配优化的片段筛选方案
- 单端接头(Single Index, SI)和双端唯一接头(MGI Unique Dual Index, MDI)可选
建库应用
应用方向 |
样本类型 |
推荐起始量 |
全基因组测序 |
血浆游离 DNA(无大片段污染) |
≥ 1 ng(依据检测需求调整) |
靶向捕获测序 |
血浆游离 DNA(无大片段污染) |
≥ 1 ng(依据检测需求调整) |
建库流程
产品表现
文库产出稳定高效
图1. NadPrep®️ 血浆游离 DNA 双端分子标签文库构建试剂盒(for MGI)对不同 DNA 起始量的文库产出。A. 搭配 NadPrep®️ BMI Adapter (MDI) Module 时 cfDNA 文库的产出稳定;B. 搭配 MDI 接头模块时的 cfDNA 文库片段分布示例(Agilent 2100 Bioanalyzer)。
分子标签助力低频突变分析
图2. 双端分子标签分析原理示意图。
来源于两个健康捐献者的 cfDNA 以 1% 比例混合,文库制备总投入量为 10 ng,人工模拟 1% 及 0.5% 突变。在 MGISEQ-2000 测序平台上,利用双端分子标签,在不同分析与过滤方法下进行低频突变分析的结果示例如下。
表1. 低频突变分析过滤方法
分析与过滤方法 |
详情 |
No BMI |
根据片段在基因组上比对的起始、终止位点去除重复。 |
SSCS |
利用单链分子标签进行一致性分析(Call Molecular Consensus Reads),形成单链一致性序列(Single Strand Consensus Sequence, SSCS)。 |
DCS211 / DCS633 |
利用双链分子标签,即互补链(Top / Bottom)分子标签进行一致性分析,形成双链一致性序列(Duplex Consensus Sequence, DCS),且 Top 与 Bottom Reads 均 ≥1(DCS211)/ 3(DCS633)。 |
DCS211 (≥ 2) / DCS633 (≥ 2) |
DCS211 / DCS633 的基础上,支持该突变的DCS一致性序列 ≥ 2。 |
图3. 不同分析模式对于 1% 和 0.5% 模拟突变位点的 A. 灵敏度与 B. 阳性预测值。
图4. 不同分析模式对背景 “噪音” 的过滤情况。
本产品仅限研究使用,不用于临床诊断。
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